Comment dénaturer une protéine: 7 étapes (avec des images)

Peut-être que vous souhaitez dénaturer une protéine pour un projet scientifique, ou peut-être avez-vous lu sur la nourriture dénaturée et souhaitez savoir comment cela fonctionne. La dénaturation est le processus par lequel une protéine perd sa forme et sa structure en raison d`actions provenant de forces externes, y compris de la chaleur, de la radiation, des acides et des solvants. Les solvants organiques dénontent généralement des protéines. La manière exacte que vous dénaturerez une protéine dépend du particulier que vous souhaitez utiliser, car ils nécessitent tous des agents de dénaturés différents à différents niveaux. La plupart des protéines peuvent être dénaturées, cependant, si vous savez quoi changer dans l`environnement de la protéine.

Pas

Méthode 1 de 2:

Dénaturation d`une protéine

1. Utiliser la chaleur. La chaleur est l`une des voies les plus faciles et des moyens les plus courants de dénaturer une protéine. Lorsque la protéine en question est présente dans la nourriture, il suffit de cuisiner la nourriture dénaturera les protéines. De nombreuses protéines peuvent être dénaturées en les exposant à une température supérieure à 100 ° C (212 ° F). Cela permet aux protéines de coaguler et de réduire leur solubilité.

La durée de l`exposition dépend de ce que vous exposez à la chaleur. Un œuf, par exemple, peut cuire dans une casserole à feu moyen en cinq minutes, tandis qu`un rôti peut prendre des heures pour cuisiner dans un four.

Image intitulée Denature d`une protéine étape 2

2. Appliquer de l`alcool. L`alcool perturbe les liaisons d`hydrogène qui se produisent entre des groupes amides d`une liaison peptidique. Lorsqu`une protéine est exposée à une solution d`alcool, les molécules d`alcool forment de nouvelles liaisons avec la chaîne protéique. Utilisez une solution de 70% d`alcool pour briser la paroi cellulaire des bactéries et dénaturer la protéine.

Les alcools concentrés peuvent être dangereux, comme ils sont à la fois inflammables et toxiques. Toujours porter des équipements de sécurité complets, y compris des gants et une protection des yeux, et gérer dans un environnement sécurisé et contrôlé de la température.

Image intitulée Denature d`une protéine étape 3

3. Changer le pH. La structure interne d`une protéine peut être décomposée lorsque son environnement est très acide ou très alcalin, car ils perturbent les liaisons ioniques qui maintiennent les ponts de sel de la protéine ensemble. Ajouter une solution d`acide ou de base à la protéine. L`environnement environnant devrait être à un pH de plus de 10 ou moins 4 pour encourager la dénaturation. Si vous induisez le changement d`acide, le pH doit être compris entre 2 et 5.

Changer le pH peut ioniser un acide aminé, en fonction du pKa de chaque groupe fonctionnel dans cet acide aminé. Vous pouvez également ioniser le groupe amino ou le groupe carboxyle présent dans l`acide aminé.

Image intitulée Denature d`une protéine étape 4

4. Essayez les sels de métaux lourds. Les métaux lourds peuvent perturber les obligations dans la protéine, ce qui la fait perdre sa structure. Les sels de métaux lourds tels que le mercure et le plomb peuvent être utilisés pour dénaturer différentes protéines. De tels sels sont disponibles dans la plupart des fournisseurs chimiques et doivent toujours être utilisés avec prudence et équipement de sécurité approprié, y compris des gants et une protection des yeux.

Les métaux lourds peuvent interagir avec des groupes latéraux fonctionnels de protéines pour former des complexes. Les métaux lourds s`oxyent également les chaînes latérales d`acides aminés de la protéine.

Méthode 2 sur 2:

Protéines de renatage

1. Déterminer si une protéine peut afflanger. Certaines formes de dénaturation sont permanentes, tandis que d`autres peuvent être annulées. Cuire un œuf ou une viande, par exemple, ne peut pas être défaite, mais une protéine qui a été exposée à un pH élevé peut reprendre forme lorsqu`il est placé dans un environnement plus neutre.

Que la protéine puisse ou non être portée dépendra de son ADN. L`ADN détiendra les informations nécessaires à la protéine de retourner à son état natal.

Image intitulée Denature d`une protéine étape 6

2. Retirer le facteur de dénaturation. Retourner l`environnement autour de la protéine vers la stase et retirez l`élément dénaturant. Retirez l`acide ou la base, par exemple, ou ramenez la protéine à une température plus raisonnable.

Image intitulée Denature d`une protéine étape 7

3. Utilisez un kit de renaturation. De nombreuses entreprises de fournitures de laboratoire vendent des kits de renaturation qui vous permettent d`afficher les meilleurs paramètres pour encourager la renaturation. De tels kits peuvent être particulièrement utiles si vous regardez des protéines dans un laboratoire ou un cadre expérimental.

Conseils

Une protéine dénaturée perd sa structure quintetière, tertiaire et secondaire qui apparaît dans son état indigène, mais sa structure principale restera.

Une protéine dénaturée perd également une partie de sa bioactivité, dans certains cas, comme avec des enzymes, perdant sa capacité à fonctionner. Par exemple, des substrats ne peuvent plus être en mesure de se lier aux enzymes dénaturées.

La protéine dénaturée peut perdre sa solubilité dans une solution.

Vous pouvez également dénaturer les acides nucléiques utilisant des techniques de laboratoire pour séparer les brins.